RESUMO O tratamento térmico de toletes para a formação de mudas de cana-de-açúcar é a principal forma de manejo de Leifsonia xyli subsp. xyli (Lxx), atualmente, no Brasil. Quando imersos, as enzimas e proteínas da célula bacteriana são desnaturadas, sem causar prejuízos às gemas dos toletes. Devido a possíveis escapes à detecção e consequente sobrevivência da bactéria à termoterapia, o que pode dar origem a mudas assintomáticas, objetivou-se realizar a detecção da bactéria Leifsonia xyli subsp. xyli em toletes de cana-de-açúcar, utilizando-se técnicas moleculares e combinações de tempo e temperatura, com ou sem a adição de antibióticos. A técnica PCR convencional detectou o DNA bacteriano de Lxx somente no controle positivo, constituído de planta altamente suscetível, com alta concentração bacteriana. Já pela nested-PCR, o DNA de Lxx foi detectado em todos os tratamentos utilizados. Assim, nenhum dos tratamentos adotados na termoterapia foi capaz de eliminar a Lxx dos toletes, bem como o uso de kasugamicina também não propiciou a eliminação da bactéria, mas reduziu sua população nos tratamentos testados. Estes resultados atestam a nested-PCR como ferramenta útil para a comprovação da presença da fitobactéria em toletes que serão utilizados como mudas.
ABSTRACT The thermotherapy of sugarcane setts is currently the primary management method for Leifsonia xyli subsp. xyli (Lxx), in Brazil. When they are immersed, the enzymes and proteins of the bacterial cell are denatured without harming the setts buds. Due to possible escapes from detection and consequent bacterium survival to thermotherapy, what may result in asymptomatic seedlings, this study aimed to detect the Leifsonia xyli subsp. xyli bacterium in sugarcane setts using molecular techniques and different time and temperature combinations, with or without the addition of antibiotics. The conventional PCR method detected the Lxx bacterial DNA only in the positive control, consisting of a highly susceptible plant with a high bacterial concentration. Using the nested-PCR, the Lxx DNA was detected in all the treatments used. Thus, none of the treatments adopted in the thermotherapy was able to eliminate the Lxx from the setts, and the use of kasugamicin also did not eliminate the bacterium, but reduced the bacterial population in the tested treatments. These results confirm that the nested-PCR is a useful tool to detect the presence of this phytobacterium in setts that will be used as seedlings.
